1 材料与方法
1. 4 标本dna 的提取及pcr 扩增 提取摸板dna , pcr 循环参数: 首先95℃变性5 m in, 然后94℃变性30 s, 退火55℃ 30 s, 延伸72℃ 40 s, 扩增30 个循环, 最后72℃延伸5m in扩增产物在2%琼脂糖凝胶(含0. 5 m g·l - 1溴化乙锭) 上电泳, 在暗箱式紫外检测分析仪内观测, 通过凝胶成像仪储存于电脑中
葡萄球菌皮肤烫伤样综合征( staphylococcalscalded sk in syndrom e, ssss) 是由金黄色葡萄球菌产生的表皮剥脱毒素引起, 主要发生于婴幼儿的严重感染, 该病来势凶猛, 若不及时治疗预后不良所以, 早期、快速、准确的诊断, 对缩短病程、降低患儿死亡率具有重要意义
1. 1 研究对象 1999 年3 月至2001 年2 月临床诊断为ssss, 未用过抗生素及其他药物的患者共34 例, 男性18 例, 女性16 例, 年龄14 d~ 12 岁,平均5. 21 岁; 37 例脓疱疮患者和11 例非金黄色葡萄球菌型中毒性表皮坏死松解症患者
1. 3 引 物 选取编码剥脱毒素a (eta )、剥脱毒素b (etb ) 蛋白的基因剥脱毒素a 基因(eta )、剥脱毒素b 基因(etb) 的特定核苷酸序列为引物, 由上海生工生物工程公司合成并纯化引物1, 5′2 cta tttactgta gga gcta g - 3′, 引物2, 5′2 a ttta tttga tgctctcta t23′, 引物1和引物2 特异性扩增片段长度为741 bp , 用于检测eta; 引物3, 5′2 a tacacaca ttacgga taa t23′, 引物4, 5′2 caaa gtgtctccaaaa gta t23′, 引物3 和引物4 特异性扩增片段长度为629 bp ,用于检测etb
2 结 果
(本文内容/图片转自网络,仅供参考,一切诊断及医疗的依据请遵从医生的指导)
共检测34 例ssss 患者标本, 采用pcr 方法检测ssss 原发皮损中的eta、etb、eta 和etb 阳性结果分别为21 例(61. 76% )、7 例(20. 58%) 和4 例(11. 76) ; 应用el isa 方法检测标本培养分离菌株eta、etb、eta 和etb 阳性结果分别为10 例(29. 41% )、4 例(11. 76% ) 和1 例(2. 94%)经统计学处理差异有显著性(p 更多传染性脓疱病问题
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1. 2 标本采集 ssss 患者取原发皮损的渗液或痂皮、水疱液各1. 5 m l; 脓疱疮患者取原发皮损的脓液或痂皮; 非金黄色葡萄球菌型中毒性表皮坏死松解症患者取水疱液各1. 5 m l
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